標(biāo)題:雞冠中透明質(zhì)酸的提取

  [摘要] 透明質(zhì)酸是一種酸性粘多糖,廣泛用于眼科手術(shù)和化妝品。用蒸餾水提取、氯仿去蛋白、乙醇沉淀和純化可以從雞冠中獲得透明質(zhì)酸。
  [關(guān)鍵詞] 透明質(zhì)酸;粘多糖;提;純化
  1 引言
  透明質(zhì)酸(hyaluronic acid)簡稱ha,是一種酸性粘多糖,廣泛存在于動物的組織細胞間質(zhì)(基質(zhì))和某些細菌的莢膜中。meyer和palmer等[1]人于1934年從牛眼玻璃體中分離出的一種高粘性物質(zhì),并隨之命名為透明質(zhì)酸。kendell等于1937年從細菌體內(nèi)提取到ha。在臨床上,透明質(zhì)酸用于視網(wǎng)膜脫離手術(shù),是眼科手術(shù)中必備的藥品[2];同時,透明質(zhì)酸是理想的保濕因子,廣泛用于化妝品中[3]。
  ha的生產(chǎn)工藝主要分為兩大類[ ……(快文網(wǎng)http://m.hoachina.com省略546字,正式會員可完整閱讀)…… 
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中加等體積的氯仿、正丁醇溶液,靜置分層后,吸出上層水相,移入另一燒杯中。
  2.6 酶處理[9] 在以上水相中,先用8%的naoh溶液調(diào)節(jié)水相的ph值為7.5左右,加熱至37℃恒溫,加入鏈酶蛋白酶,保溫過夜,得酶解液。
  2.7 再次除雜物 在上述酶解液中加入等體積的氯仿、正丁醇溶液,攪拌均勻,靜置分層后,吸出上層水相,水相再加氯仿、正丁醇溶液,按相同方法處理2次,合并上層水相,下層液體供回收氯仿用。
  2.8 十六烷基三甲基溴化銨(ctab)沉淀將吸出的水相移入燒杯中,攪拌下加入等體積1%的十六烷基三甲基溴化銨溶液,靜置過夜,濾除清液,收集沉淀物。
  2.9 溶解 將十六烷基三甲基溴化銨的沉淀物用2~3倍體積的0.8摩爾/升氯化鈉溶液攪拌解離30~40min,然后用離心機離心10min,除去沉淀,收集解離液。
  2.10 乙醇沉淀 把解離液倒入燒杯中,攪拌下加入3倍體積的95%乙醇,靜置沉淀7~8小時,虹吸除去上層乙醇液(供回收乙醇)。下層沉淀再加95%乙醇反復(fù)沉淀2次,收集下層沉淀物,吊濾至干。
  2.11 干燥 將吊干的產(chǎn)品用丙酮洗滌2次,或放在真空干燥箱中干燥,至完全干燥即得精品。
  3 工藝說明
  ①用去離子水提取透明質(zhì)酸,可防止硫酸軟骨素的混入,便于下一步純化,收率較高。
 、诩渔溍傅鞍酌,分級沉淀等溫和條件,可保持透明質(zhì)酸的大分子特性,并有效地除去蛋白質(zhì)和核酸等雜物。
 、塾靡掖汲恋硗该髻|(zhì)酸水提取液時,有纖維狀和粉狀兩種沉淀產(chǎn)生,纖維狀飄浮于乙醇上部,粉狀在乙醇下部。但在強酸條件下,用氯仿處理提取液沉淀時,纖維狀沉淀消失,溶液粘度明顯降低。這說明纖維狀沉淀與透明質(zhì)酸大分子特性及溶液濃度有關(guān)。當(dāng)溶液濃度小于0.05%時,透明質(zhì)酸分子大多獨立存在,當(dāng)濃度大于0.1%時,部分交織成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。據(jù)分析,這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)沉淀下來呈現(xiàn)纖維狀,部分散在的分子沉淀下來呈粉狀。
  4 結(jié)束語
  應(yīng)用酶解法從雞冠中提取得到透明質(zhì)酸,工藝簡單,生產(chǎn)環(huán)節(jié)少,降低了對透明質(zhì)酸的破壞,生產(chǎn)同一批號的透明質(zhì)酸性能相近,說明工藝穩(wěn)定可靠。
  參考文獻
  [1]meyer k, palmer j w. the polysaccharide of the vitreous hourmor. [j] journal of biology chemistry,1934,107:629-633
  [2]徐積恩.透明質(zhì)酸的應(yīng)用開發(fā)和市場[j],江蘇食品與發(fā)酵,1996,1:27~29
  [3]馮文帥.透明質(zhì)酸及其發(fā) ……(未完,全文共2358字,當(dāng)前只顯示1419字,請閱讀下面提示信息。收藏雞冠中透明質(zhì)酸的提取

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